Sist oppdatert: 12.11.2024
    Utgiver:
    Versjon: 1.5
    Forfattere: Guro Archer lauritzen, Assia Vassileva Bassarova
    Kopier lenke til dette emnet
    Foreslå endringer/gi kommentarer

    Viktig informasjon 

    • Rekvisisjonen skal inneholde opplysninger om hvor prøvene er tatt, om de er lesjonelle/perilesjonelle (ikke-lesjonelle)
    • Ved utredning av LE er det anbefalt å ta prøver fra ikke soleksponert hudområde
    • Histocon anbefales for prøver til IF-undersøkelse
    • Prøver til IF-undersøkelse må leveres innen kl 15:00 mandag til fredag

    Indikasjon 

    • Hud - /slimhinnebiopsi for undersøkelse med hensyn på nedslag av immunglobuliner, fibrinogen og komplement.
    • Ved utredning av alle immunobulløse dermatoser, lupus erythematosus, vasculitt forandringer, cøliaki / dermatitis herpetiformis

    Rekvirering 

     

    Rekvisisjonen skal inneholde alle viktige opplysninger med kort beskrivelse av sykehistorien, hvor lenge har pasienten har hatt de forandringene, har pasienten fått behandling, hvilket medikamenter og når var siste behandlingen.

     

    Informasjon om fra hvilket hudområde (både for vanlig histologi og til IF) prøven er tatt og er det fra affisert / lesjonell eller frisk / perilesjonell sted.

    Prøvemateriale 

    Prøvetaking og prøvebehandling 

    Hudbiopsi:

    • Fra lesjonell / affisert hud: anbefales 1 biopsi til vanlig histologisk undersøkelse dvs 1 stansebiopsi på 10% NBF (neutral bufret formalin)
    • Fra perilesjonell / ikke affisert hud: anbefales biopsi på Histocon, ( alternativt: saltvann hvis kort transporttid, dvs innen 24 timer)
    • Biopsiene legges i separate prøvebeholdere og merkes tydelig med hhv ”Til IF” og "histologi", samt type transportmedium

     

    Prøvebeholder IF:

    • Benytt beholder med skrukork, eksempelvis universal Container.
    • Fyll beholder med rikelig histocon slik at preparatet ikke blir liggende langs kanten og tørker. Ved transporttid < 24 timer etter prøvetaking kan saltvann benyttes som transportmiddel.
    • Merk tydelig med type medium på prøvebeholder
    • Merk prøvebeholder med entydig pasientidentifikasjon og dato

     

    For histologisk undersøkelse se, Hudbiopsi, histologisk undersøkelse

    Oppbevaring og forsendelse 

    Rekvirenter som vurderer å sende prøver til immunfluorescens for første gang, bes ta kontakt med enhet for immunhistokjemi, se Kontaktinformasjon

     

    Biopsi til IF - eksterne rekvirenter

    • Prøvematerialet oppbevares i kjøleskap inntil forsendelse
    • Prøven sendes snarest mulig etter prøvetaking
    • Prøveglasset sendes på is i en isoporekse. Materialet må ikke komme i kontakt med is/ ikke fryses
    • Biopsiene foretrekkes sendt i Histocon (ved forsendelsestid under 24 timer kan prøven sendes på saltvann)
    • Merk forsendelsen med "biologisk materiale" og "Haster"
    • Prøven må leveres innen kl 15:00 mandag til fredag
    • Prøver til både IF- og histologisk undersøkelse sendes samlet

     

    Leveringsadresse

    Ved bruk av OUS felleskonvolutt: Kryss av for Ullevål sykehus og patologi.

    Ved bruk av annen konvolutt: Merk konvolutten med Oslo Universitetssykehus, Ullevål sykehus, Avdeling for patologi, Enhet for histologi, Bygg 25, Kirkeveien 166, 0450 Oslo

     

    Biopsi til IF- interne rekvirenter (Rikshospitalet):

    • Prøven sendes Avdeling for patologi Rikshospitalet snarest mulig etter prøvetaking
    • Prøven oppbevares kjølig før sending
    • Prøven sendes med portør
    • Histocon foretrekkes (ved forsendelsestid under 24 timer kan prøven sendes på saltvann)

     

    Histocon:

    • Histocon er det beste mediet for sending av hudprøver til IF.
    • Histocon gjør at osmolalitet og pH holder seg stabilt i 24-48 timer og inneholder et middel som forhindrer artefakter (iskrystaller) når man fryser ned biopsien, samt midler som hemmer bakterie-vekst og autolyse i prøven under transport.
    • Histolcon reduserer lekkasje av vevskomponenter under transport, bevarer katalytisk aktivt enzym opp til 48 timer, gir kjernekonfigurasjon i celler i frossent vev som tilsvarer det i formalinfikset vev, muliggjør strukturell og cytokjemisk undersøkelse etter kryoseksjon prosessering når vevet har vært i Histocon i opptil 24 timer (4 ° C)
    • Vevsprøver kan være i Histocon opptil 48 timer uten å få nedsatt morfologi

    Utførende laboratorium 

    • Enhet for immunhistologi, Rikshospitalet

    Forventet svartid 

    De vanlige formalin fikserte biopsier besvares i ca. 3-4 ukers tid.

    Avhengig av problemstillingen, pasientens alder, hastihetsgraden er de IF biopsiene besvarte på en senere tidspunkt. Det kan ta opp til 3-4 uker for å få svar fra IF-undersøkelsen, som oftest sendes som tillegskommentar.

    IF-prøvene fra yngre pasienter og pasienter med alvorlig klinisk sykdom besvares i løpet av 1, maks. 2 uker.

    Undersøkelsesprinsipp 

    • Immunfluorescensteknikk

     

    For å vurdere immunnedslag foretas undersøkelse med immunfluorescensteknikk hvor frysesnitt farges med antistoffer rettet mot immunglobulinene IgA, IgG og IgM, komplement komponenten C3 og fibrinogen.

    Svar 

    Prøvesvar fra IF-undersøkelsen sendes enten samtidig med diagnosen fra formalinfikserte materialet eller eventuelt som en tilleggskommentar, hvor ansvarlig overlege skriver et kort kommentar om funn og sammenfattes med resultatet fra lysmikroskopisk bilde.

     

    Svar rapporteres vanligvis som påvist / ikke påvist nedslag av hviklet immunglobulin / komplement eller fibrinogen og hvor er det lokalisert (intraepidermalt, subepidermalt, i karvegg, langs hudadneksstrukturer).

    Tolkning 

    Undersøkelsen besvares av overlege i patologi med spesialkompetanse i hudpatologi. IF resultatene sammenfattes og tolkes på bakgrunn av sykehistorie, symptombilde og resultater av den vanlig histologisk undersøkelse fra formalinfikserte vev (i de fleste tilfeller er det samtidig sendt inn vevsprøve for rutinemessig lysmikroskopi).

     

    Svaret gis som en eller flere endelige diagnoser der funnene fra lys- og elektronmikroskopiske undersøkelser sammenfattes, oftest supplert med en vurdering av de samlede funnene.

    Nyttige lenker 

    Referanser 

    https://dermnetnz.org/topics/direct-immunofluorescence

     

    Shetty VM, Subramaniam K, Rao R. Utility of immunofluorescence in dermatology. Indian Dermatol Online J. 2017 Jan-Feb;8(1):1-8. doi: 10.4103/2229-5178.198774. PMID: 28217464; PMCID: PMC5297263.

     

    Mayo Clinic Atlas of Immunofluorescence in Dermatology - 2019 Amer N. Kalaaji, Marie E.O. Nicolas

    ISBN: 9780367390976

     

    Handbook of Direct Immunofluorescence: A Pattern-Based Approach to Skin and Mucosal Biopsies 2018 Douglas Fullen

    ISBN-10 : 9781907816901